1配製

A液:1.5克二苯胺(C12H11N)溶於100ml冰醋酸(乙酸,C2H4O2)中,再加1.5ml濃硫酸,用棕色瓶保存(光下分解)。如冰醋酸呈結晶狀態,則需加溫后待其熔化,再使用。
B液:體積分數為0.2%的乙醛溶液(C2H4O)。
將0.1ml B液 加入10ml A液中,製成二苯胺試劑,現配現用。

2作用原理

在沸水浴的條件下,DNA與二苯胺反應呈現藍色。因此,二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

3使用方法

1、配製二苯胺試劑 取0.1mLB液,滴入到10mLA 液中,混勻。
2、鑒定:取4mLDNA提取液放入試管中,加入4mL二苯胺試劑,混勻后觀察溶液顏色(不變藍)。
用沸水浴加熱。在加熱過程中,隨時注意試管中溶液顏色的變化(逐漸出現淺藍色)。
3、加熱后冷卻觀察。

4加熱后冷卻觀察的原因

DNA在酸性條件下加熱,其嘌呤鹼與脫氧核糖間的糖苷鍵斷裂,生成嘌呤鹼、脫氧核糖和脫氧嘧啶核苷酸,而2-脫氧核糖在酸性環境中加熱脫水生成ω-羥基-γ-酮基戊糖,與二苯胺試劑反應生成藍色物質。
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