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亞硝酸鹽還原試驗

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1 亞硝酸鹽還原試驗 -原理

  原理:硝酸鹽還原反應包括兩個過程:一是在合成過程中,硝酸鹽還原為亞硝酸鹽和氨,再由氨轉化為氨基酸和細胞內其他含氮化合物;二是在分解代謝過程中,硝酸鹽或亞硝酸鹽代替氧作為呼吸酶系統中的終末受氫體。能使硝酸鹽還原的細菌從硝酸鹽中獲得氧而形成亞硝酸鹽和其他還原性產物。但硝酸鹽還原的過程因細菌不同而異,有的細菌僅使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,如大腸埃希菌;有的細菌則可使其還原為亞硝酸鹽和離子態的銨;有的細菌能使硝酸鹽或亞硝酸鹽還原為氮,如假單胞菌等。硝酸鹽還原試驗系測定還原過程中所產生的亞硝酸。

2 亞硝酸鹽還原試驗 -培養基和試劑

  培養基:硝酸鹽培養基。

  試劑:甲液(對氨基苯磺酸0.8g+5mol/L醋酸lOOml;乙液(α-奈胺0.5g + 5mol/L醋酸lOOml)。

3 亞硝酸鹽還原試驗 -方法

  被檢菌接種於硝酸鹽培養基中,於35℃培養l~4d.將甲、乙液等量混合后(約0.1m1)加入培養基內,立即觀察結果。

4 亞硝酸鹽還原試驗 -結果

  結果:出現紅色為陽性。若加入試劑后無顏色反應,可能是:①硝酸鹽沒有被還原,試驗陰性;②硝酸鹽被還原為氨和氮等其他產物而導致假陰性結果,這時應在試管內加入少許鋅粉,如出現紅色則表明試驗確實為陰性。若仍不產生紅色,表示試驗為假陰性。

  若要檢查是否有氮氣產生,可在培養基管內加一小倒管,如有氣泡產生,表示有氮氣生成。

5 亞硝酸鹽還原試驗 -應用

  應用:本試驗在細菌鑒定中廣泛應用。腸桿菌科細菌均能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽;銅綠假單胞菌、嗜麥芽窄食單胞菌等假單胞菌可產生氮氣;有些厭氧菌如韋榮球菌等試驗也為陽性。

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