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細胞數量達飽和密度后,細胞遂停止增殖,進入停滯期。此時細胞數量不再增加,故也稱平頂期(Plateau)。停滯期細胞雖不增殖,但仍有代謝活動,繼而培養液中營養漸趨耗盡,代謝產物積累、pH降低。此時需做分離培養即傳代,否則細胞會中毒,發生形態改變,重則從底物脫落死亡,故傳代應越早越好。指細胞自移植於新培養基時起,至開始出現活躍繁殖的這一期間。一般被移植的細胞越是培養後期的,其停滯期越長。其原因是培養後期的細胞群在一定程度上進行同步化,而G1期的細胞比例高,進入分裂期需要時間;另外來自原培養期間所受的退行性變化的恢復也是重要的原因。
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