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動物細胞培養

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1概念

動物細胞培養(animal cell culture)就是從動物機體中取出相關的組織,將它分散成單個細胞(使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶)然後,放在適宜的培養基中,讓這些細胞生長和增殖。
細胞培養是指細胞在體外條件下的生長,動物細胞在單獨細胞培養的過程中不再形成個體。

2簡介

動物細胞培養液的特點
液體培養基、通常含動物血清。

動物細胞培養的條件

1.無菌、無毒的環境:對培養液和所有培養用具進行無菌處理,通常還要在培養液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外應定期更換培養液,以便清除代謝產物防止細胞代謝產物累積對細胞自身產生危害。
2.營養物質:無機物(無機鹽、微量元素等),有機物(糖、氨基酸、促生長因子等)
3.血清和血漿 (提供細胞生長必須的營養成份)
4.溫度和pH(36.5±0.5℃,7.2~7.4)
5.氣體環境(95%的空氣+5%CO
動物細胞培養

  動物細胞培養

2的混合氣體)
其中5%CO2氣體是為保持培養液的pH穩定
基本過程
取動物胚胎或幼齡動物器官、組織。將材料剪碎,並用胰蛋白酶(或用膠原蛋白酶)處理(消化),形成分散的單個細胞,將處理后的細胞移入培養基中配成一定濃度的細胞懸浮液。懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上,成為細胞貼壁。當貼壁細胞分裂生長到互相接觸時,細胞就會停止分裂增殖,出現接觸抑制。此時需要將出現接觸抑制的細胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細胞懸浮液。另外,原代培養就是從機體取出后立即進行的細胞、組織培養。當細胞從動植物中生長遷移出來,形成生長暈並增大以後,科學家接著進行傳代培養,即將原代培養細胞分成若干份,接種到若干份培養基中,使其繼續生長、增殖。通過一定的選擇或純化方法,從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質的細胞稱為細胞株。當培養超過50代時,大多數的細胞已經衰老死亡,但仍有部分細胞發生了遺傳物質的改變出現了無限傳代的特性,即癌變。此時的細胞被稱為細胞系。
培養基添加胰島素可促進細胞對葡萄糖的攝取

3分類

1 根據細胞種類:原代細胞培養, 傳代細胞培養
原代細胞:培養的細胞為正常的動物細胞,一般培養3-5代后不再增殖,死亡。
傳代細胞:培養的細胞為癌變或人為癌化的細胞,理論上可以無限增殖。癌化的方式有很多:進行癌基因突變,感染病毒,從癌症供體體內分離,物理或化學方法(如紫外,化學試劑)等。
2 根據培養方式:貼壁細胞培養,半懸浮細胞培養,懸浮細胞培養

4區別

1.培養基不同:植物細胞(固體培養基),動物細胞(液體培養基)
2.培養基的成分不同:動物細胞培養必須利用動物血清,植物組織培養則不需要,而需要加入植物生長激素
3.產物不同:植物組織培養最後一般得到新的植物個體,而動物細胞培養因為動物體細胞一般不能表達其全能性,因此得到的是只含同一種的細胞的一個細胞系(或者叫細胞群)。
4.原理不同:植物組織培養的原理為植物細胞的全能性,動物細胞培養的原理為細胞的增殖。
5.過程不同:植物組織培養的過程為脫分化和再分化,動物細胞培養的過程為原代培養和傳代培養

5技術應用

1.生物製品的生產(如製備單克隆抗體)
2.轉基因動物的培養
3.檢測有毒物質並判斷其強弱
4.醫學研究(生理 病理 藥理)
5.器官移植培養
6.篩選抗癌藥物
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