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目錄

包括細菌、放線菌、酵母菌、絲狀真菌、高等真菌、單細胞藻類、人和動物細胞系、轉基因細胞、雜交瘤、原生動物、地衣、植物組織培養、植物種子、動植物病毒、噬菌體、質粒、基因片段、基因文庫和其它生物材料(最高物理防範等級不超過P2級)以及生物材料的混合培養物等各類培養物(生物材料/菌種)。共有來自20多個國家和地區的各類專利培養物(生物材料/菌種)1600多株、非專利培養物5000多株、標準細胞系和模式菌株300餘株,被存放在零下196℃的液氮中。

1 培養物保藏 -簡介

保藏方法大致可分為以下幾種:

1.傳代培養保藏法

又有斜面培養、穿刺培養、皰肉培養基培養等(後者作保藏厭氧細菌用),培養後於4—6℃冰箱內保存。

2.液體石蠟覆蓋保藏法

是傳代培養的變相方法,能夠適當延長保藏時間,它是在斜面培養物和穿刺培養物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養基水分蒸發而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進入,以減弱代謝作用。

3.載體保藏法

是將微生物吸附在適當的載體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而後進行乾燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應用相當廣泛。

4.寄主保藏法

用於目前尚不能在人工培養基上生長的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內感染並傳代,此法相當於一般微生物的傳代培養保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍乾燥保藏法進行保藏。

5.冷凍保藏法

可分低溫冰箱(-20—-30℃,-50—-80℃)、乾冰酒精快速凍結(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。

6.冷凍乾燥保藏法

先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然後在減壓下利用升華現象除去水分(真空乾燥)。

有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍乾燥保藏法等均需使用保護劑來製備細胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對細胞的損害。保護性溶質可通過氫和離子鍵對水和細胞所產生的親和力來穩定細胞成分的構型。保護劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞碸等。

參考資料

[1] 西祠衚衕 http://www.xici.net/b792646/d61615936.htm

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