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核酸凝膠電泳

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1 核酸凝膠電泳 -電泳的基本原理

  生物大分子在一定pH條件下,通常帶電荷,將其置於電場中,會以一定的速度向與其電荷性質相反的電極遷移,遷移速度稱電泳速率。

  電泳速率與電場強度、分子所帶的凈電荷數成正比,與分子與介質的摩擦係數成反比。 摩擦係數與分子的大小、構型及介質的粘度有關。

  在生理條件下,DNA分子糖-磷酸骨架中的磷酸基團呈離子化狀態,故DNA實際上呈多聚陰離子狀態,在電場中向 方向遷移。

  糖-磷酸骨架在結構上重複,故等量的雙鏈DNA幾乎帶等量的凈電荷。

  如電場強度一定、電泳介質相同,電泳速率就取決於核酸分子的大小和構型。 構型相似的分子:分子量越大、遷移越慢。

  分子量相同的分子(如質粒):

  cccDNA遷移最快、L-DNA次之、ocDNA最慢。

2 核酸凝膠電泳 -固體支持介質:

  瓊脂糖(agarose)

  聚丙烯醯胺(polyarylamide)

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