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  一、色譜柱的構造:

  柱管、壓帽/卡套、篩板(濾片)、接頭
液相色譜柱月旭色譜柱
 分析型

  常規分析柱(4.0/3.9mm、4.6mm)

  窄徑柱(1.0mm、2.1mm)

  毛細管柱(0.2-0.5mm)

  製備型

  半製備柱(〉5mm,7.8mm、9.8mm、10mm)

  製備柱(21.2mm、30mm、50mm)

  保護柱

  保護柱套

  保護柱芯

  二、色譜柱填料基質:

  1. 硅膠基質- pH 2-8 ------------------ 高或低pH下, 硅膠會溶解

  2. Al2O3 . nH2O - pH1-14-----------化學修飾困難

  3. 聚合物基質 - pH1-14-------------孔結構複雜, 孔徑不均勻導致柱效不夠高, 有機溶劑可能導致聚合物基質溶漲而受損

  三、C18色譜柱---性能影響因素

  A:物理因素1.硅膠純度 ----· 填料硅膠的純度與殘留金屬離子濃度

  2.色譜柱尺寸---· 填料床的長度和內徑

  3.顆粒形狀------· 球型或不規則型

  4. 粒徑------------· 平均顆粒直徑, 通常3-10µm

  5.表面積---------· 顆粒外表面和內部孔表面的總和, 以m2/gram表示

  6.孔徑------------· 顆粒的孔或腔的平均尺寸, 範圍80-300Å

  B:化學性質

  1.鍵合類型----- · 單體鍵合 - 鍵合相分子與基體單點相連

  2.碳覆蓋率------· 與基體物質相連的鍵合相的量

  3.封端------------· 鍵合步驟之後, 用短鏈將裸露的硅羥基鍵合后封閉起來

  四、如何推薦色譜柱

  在選擇色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質,他們的類型結構、極性、酸鹼性、分子量大小等等,

  1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱

  2. 如果樣品極性太強,或酸性太強;可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長,對流動相pH要求比較精密,否 則很難重複實驗,另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用於其它實驗)

  3. 若樣品是鹼性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質,且硅膠端基封尾)或一些經過修飾的C18柱(如極性嵌入技術或鹼去活技術等),他們都會減少鹼性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏鹼的條件下做,因為這樣可增加鹼性樣品的保留

  4.如果鹼性化合物的極性太強,或鹼性太強;可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(優點是方法開發簡單,缺點是目前實 現這一技術的色譜柱品牌比較少,價格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是很經典的檢測鹼性樣品的方法)選擇強離子交換柱(缺點 是不能用來分析其它樣品,對流動相pH要求比較精密,否則很難重複實驗)也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱
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