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細胞毒性是由細胞或者化學物質引起的單純的細胞殺傷事件,不依賴於凋亡或壞死的細胞死亡機理。有時需要進行特定物質細胞毒性的檢測,比如藥物篩選。
細胞毒性檢測主要是根據細胞膜通透性發生改變來進行的檢測,常用以下幾種方法:
MTT、XTT法:利用線粒體內部酶的活性,可以將特定的四唑鹽類進行轉化,然後通過酶標儀進行檢測
LDH的方法:通過檢測細胞培養上清中LDH的酶活性,來檢測細胞毒性
其它酶方法:如檢測上清中鹼性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等
細胞增殖能力分析試劑盒
原理:正常細胞代謝旺盛,其線粒體內的琥珀酸脫氫酶,可將四唑鹽類物質(如 MTT、XTT、WST-1等 )還原為紫色的結晶狀的物質,沉積在細胞周圍,然後通過酶標儀讀取OD值,從而檢測到細胞增值狀態
熒光素髮光法細胞生存能力檢測
原理:腺苷酸激酶(AK)存在於所有真核和原核細胞的胞漿中,AK具有激活ADP生成ATP。當細胞受損后,細胞膜發生破損,AK會釋放到培養上清中。該試劑盒利用熒光素酶和熒光素在ATP作用下可以發光,通過化學發光儀可以定量進行檢測。
LDH法細胞毒性檢測
原理:LDH(乳酸脫氫酶)是一種穩定的蛋白質,存在於正常細胞的胞質中,一旦細胞膜受損,LDH即被釋放到細胞外; LDH催化乳酸形成丙酮酸鹽,和INT(四唑鹽類)反應形成紫色的結晶物質,可通過500nm酶標儀進行檢測。通過檢測細胞培養上清中LDH的活性,可判斷細胞受損的程度
"細胞毒性" 英文對照
cytotoxic; cell toxicity; cytotoxicity;
"細胞毒性" 在學術文獻中的解釋
1、根據歐洲標準化組織CEN1992年30號文件的定義,細胞毒性是指由產品、材料及其浸漬物所造成的細胞死亡、細胞溶解和細胞生長抑制
文獻來源
2、細胞毒性是指該物質對培養細胞的毒性通常用P--388LulZ0白血病細胞或KB腫瘤細胞作體外試驗.檢驗海洋天然產物的細胞毒性常利用海膽受精卵觀察樣品對其細胞分裂的抑制作用
文獻來源
3、強其細胞毒性並促進這兩種細胞增殖又稱為細胞毒性

1分類及應用

細胞毒性是化學物質(藥物)作用於細胞基本結構和/或生理過程,如細胞膜或細胞骨架結構,細胞的新陳代謝過程,細胞組分或產物的合成、降解或釋放,離子調控及細胞分裂等過程,導致細胞存活、增殖和/或功能的紊亂,所引發的不良反應。按作用機制可分3種類型:
①基本細胞毒性,涉及一種或多種上述結構或功能的改變,作用於所有類型的細胞;
②選擇細胞毒性,存在於某些分化細胞上,主要通過化學物質的生物轉化,與特殊受體結合或特殊的攝入機制所引發;
③細胞特殊功能毒性,對細胞結構和功能損傷輕微,但對整個機體損傷非常嚴重。類似毒性作用可通過細胞因子、激素和遞質的合成、釋放、結合和降解影響細胞與細胞間的交流或特殊的轉運過程而實現。毒性作用也可能來自化學物質對細胞外過程的干擾,任何一種非動物檢測系統對多種因素都應加以考慮。1983年Ekwall提出「基本細胞功能」的概念,即多數化學物質毒性作用是對細胞功能的非特異性損傷,卻可引起器官功能的特異性改變甚至機體死亡。
有研究顯示化學物質體外細胞毒性與其引起的動物死亡率及人體死亡的血葯濃度之間都存在良好的相關性。化學物質產生的損傷和死亡,最終可表現為細胞水平上的改變,由此推測體外細胞毒性可以預測體內急性毒性。從早期研究至今已有50多年,可預測體內急性毒性的體外系統得到發展。體外細胞毒性和急性毒性之間的定量研究主要是對RC(Registry of Cytotoxicity)資料庫(美國國立職業安全與衛生研究所化學物質毒性作用資料庫)中多種化學物質的體外細胞毒性IC50值及體內急性毒性LD50值進行相關分析,獲得RC預測模型,用於急性毒性LD50值預測。利用細胞毒理學比較多種檢測終點、不同組織和種屬的預測能力,發現嚙齒動物細胞系對嚙齒動物急性毒性,人源細胞系對人體急性毒性均有良好的預測能力。BALB/c3T3細胞和人正常角質細胞(NHK)在驗證實驗中具有良好的穩定性及預測能力,因此推薦作為細胞毒性分析常用細胞系,其它細胞系及檢測終點也可使用。體外方法有助於預測化學物質急性暴露引發的全身和局部影響,並評估體內毒性濃度。因此進行急性毒性檢測前首先進行體外細胞毒性分析,然後根據RC預測模型進行LD50值預測,選擇體內急性毒性最適宜的開始劑量,減少實驗動物的使用。

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