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組織培養繁殖

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1概述

組織培養繁殖是在人工培養基中,使離體組織細胞培養成為完整植株的繁殖方法。果樹的組織培養材料是植株離體材料,稱外植體。用頂端分生組織及其下的第1-2個葉原基切離培養的,稱莖尖培養;以小段成熟枝條進行培養的稱莖段培養;以葉片或葉鞘組織進行培養的,稱葉片培養。 利用組織培養方法繁殖果樹植株具有佔地面積小,繁殖周期短,全年都能進行繁殖,繁殖係數高等特點。還可以消除果樹的某些病毒病,適應果樹向品種更新快、矮化密植以及無病毒栽培方向發展的需要。
果樹組織培養繁殖的研究,始於20世紀40年代。中國起步較晚,但發展較快。已在蘋果、葡萄、柑橘、草莓、獼猴桃、菠蘿、枇杷等樹種上開展了組培脫毒和苗木繁殖工作,建立了蘋果、葡萄、草莓、獼猴桃等果樹的組培苗木果園。
培養基是外植體賴以生長和發育的基質。常用的培養基有含鹽種類較少,鹽量較低的White、Nitsch、Knop培養基;也有含鹽種類較多,鹽量較高的B5、B6、H Ls及M等培養基。MS培養基的主要成分包括N、P、K、Ca、Mg等大量元素和Mn、Zn、Cu、Co、B、I、Mo、Fe等微量元素、蔗糖及氨基酸、B族維生素、煙酸、肌醇等有機成分。培養基中加用6-8%的瓊脂做凝固劑。還須加入一些附加成分,如水解酪蛋白、植物激素。常用的植物激素有細胞分裂素,如激動素(KT)、六苄基腺嘌呤(BA)、玉米素(Zi)等;以及生長素,如吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)、萘乙酸(NAA)及2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)等;
常用的接種材料有莖尖、莖段、葉片等,一年四季都可取摘、接種,各季節的材料都能分化、出苗。材料的大小,因培養目的而不同,為脫除繁殖材料的病毒,就原子能0.1-0.2mm的莖尖;對一般繁殖材料,可取大莖尖或莖段培養,以提高分化率和分化速度。一般要經過以下兩個滅菌過程,先用濕潤劑處理使殺菌劑能很好滲入培養材料,濕潤劑有70-75%酒精等,酒精兼有殺菌能力;再選擇滅菌快而徹底,容易從材料上去除,並對接種材料毒害作用小的藥劑。
接種后的繁殖材料要求置於25-30℃恆溫和1500-3000勒克斯(lx)光照強度,每日光照16小時的條件下培養,苗的分化速度較快,分化苗的生長正常而迅速。
生根培養:採用1/2Ms、1/2B5、White、Knop等含鹽量低的培養基。將培養基所用的鹽類和生長素配成營養液,把夠標準的綠苗基部浸於營養液中培養生根。生根培養的溫度與擴大繁殖期間基本相同。而光照強度一般要求在2000勒克斯(lx)以上。

2英文參考

propagation by tissue culture

3漢語讀音

zǔ zhī péi yǎng fán zhí
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