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衣原體為革蘭氏陰性病原體,在自然界中傳播很廣泛。它沒有合成高能化合物ATP、GTP的能力,必須由宿主細胞提供能量,多呈球狀、堆狀,有細胞壁,一般寄生在動物細胞內。它是一種比病毒大、比細菌小的原核微生物,呈球形,直徑只有0.3-0.5微米,無運動能力,衣原體廣泛寄生於人類,哺乳動物及鳥類,少數有致病性。

1 衣原體 -簡介

衣原體衣原體

衣原體(chlamydia)是一種既不同於細菌也不同於病毒的一種微生物。原體為革蘭氏陰性病原體,在自然界中傳播很廣泛。它沒有合成高能化合物ATP、GTP的能力,必須由宿主細胞提供,因而成為能量寄生物,多呈球狀、堆狀,有細胞壁,以一般寄生在動物細胞內。從前它們被劃歸病毒,後來發現自成一類。它是一種比病毒大、比細菌小的原核微生物,呈球形,直徑只有O.3-0.5微米,它無運動能力,廣泛寄生於人類、哺乳動物及鳥類,僅少數有致病性。CHEMTRON衣原體檢測為國內使用最廣泛的衣原體檢測工具。

衣原體與病毒的主要區別在於其具有DNA、RNA兩種核酸、核糖體和一個近似細胞壁的膜,並以二分裂方式進行增殖,能被抗生素抑制。

已知的與人類疾病有關的衣原體有三種,分別是鸚鵡熱衣原體、沙眼衣原體和肺炎衣原體。這三種衣原體均可引起肺部感染。鸚鵡熱衣原體可通過感染有該種衣原體的禽類,如鸚鵡、孔雀、雞、鴨、鴿等的組織、血液和糞便,以接觸和吸入的方式感染給人類。沙眼衣原體和肺炎衣原體主要在人類之間以呼吸道飛沫、母嬰接觸和性接觸等方式傳播。

2 衣原體 -基本特徵

衣原體(Chlamydia)是一類能通過細菌濾器,嚴格細胞內寄生,有獨特發育周期的原核細胞性微生物。過去認為是病毒,現歸屬細菌範疇。衣原體廣泛寄生於人類、鳥類及哺乳動物。能引起人類疾病的有沙眼衣原體、肺炎衣原體、鸚鵡熱肺炎衣原體。 

衣原體衣原體

1、體積大於病毒,約250~500nm,在光學顯微鏡下可以查見。
2、含有DNA和RNA。
3、具有細胞壁,但無肽聚糖,只含微量的細胞壁,由二硫鍵連接的多肽作為支架。
4、對多種抗生素敏感。
5、具有一些酶類但不夠完善,這些酶缺乏產生代謝能量的作用,要由主細胞提供。能在雞胚卵黃囊及多種細胞中生長繁殖。
6、有獨特發育周期,僅在活細胞內以二分裂方式繁殖。

7.對抑制細菌的抗生素和藥物敏感。

3 衣原體 -發現與研究

衣原體可以在某些原代或傳代細菌衣原體可以在某些原代或傳代細菌

衣原體是一種原核微生物,在自然界廣泛存在,能引發人類、鳥類、家畜類的眼、關節、呼吸系統、神經系統、泌尿生殖系統疾病。衣原體感染是性病,這種說法不確切,但衣原體感染引發的一些泌尿生殖系統疾病,能通過性接觸傳播,屬於性病範疇。

衣原體最早是由宮川米次等(1935)從腹股溝淋巴肉芽腫患者的染色體中作為宮川小體而發現的,被命名為宮川氏體(Miyagawanella)(E.Brumpt,1938)。其後,相繼又出現很多其它名稱,例如,作為立克次氏體的親緣種被稱為Rickettsiaformis、Neor-ickettsia等,也有作為病毒類而稱之謂鸚鵡熱和腹股溝淋巴肉芽腫病毒(psittacosislymphogranvloma,virus,PLV)、鸚鵡熱病毒群(Psittacosis virus group)等,相當混亂。現在已按伯傑氏分類法歸為衣原體目(Chlamidiales,L.A.Pagei等,1971)。

已證明有葡萄糖代謝活性和蛋白質合成能力;在細胞液胞內增殖,不進入細胞質質內。侵染粒子通過吞噬作用進入細胞內,轉化成一般稱為網狀結構體的粒子。網狀結構體通過分裂增殖,在浸染後期成熟為侵染粒子。因此,在增殖周期中,雖沒有保持作為粒子的連續性的潛伏期,然而,由於沒有證實網狀結構體的侵染性,所以從外表看起來,有一個相當於潛伏期的時期。

4 衣原體 -生物學性狀

1、衣原體在宿住主細胞內繁殖有特殊生活周期,可觀察到兩種不同的顆粒結構:

(1)原體(elementarybody,EB)直徑為0.2~0.4的小球形顆粒,有胞壁,內有核質和核蛋白體,是發育成熟的衣原體,為細胞外形式。Giemsa染色呈紫色,Gimenez染色呈紅色。原體具有高度的感染性,在宿主細胞外較穩定,無繁殖能力,通過吞飲作用進入胞內,原體在空泡中逐漸發育、增大成為網狀體。

衣原體細菌衣原體
(2)網狀體(reticulatebody,RB)或稱始體(initialbody),EB通過吞飲作用進入胞內,由宿主包圍EB形成空泡,並在空泡內逐漸增大為RB。直徑為0.5~1.0μm,圓形或橢圓形。電子緻密度較低,無胞壁,代謝活潑,以二分裂方式繁殖。RB為細胞內形式,無感染性,Macchiavello染色呈藍色。RB在空泡內發育成許多子代EB也稱為包涵體。成熟的EB從宿主細胞中釋放,在感染新的易感細胞,開始新的發育周期,整個發育周期約需48~72h。

2、培養特性衣原體為專性細胞內寄生,不能用人工培養基培養,可用雞胚卵黃囊及HeLa-299、BHK-21、McCoy等細胞培養。將接種標本的細胞培養管離心,促進衣原體粘附進入細胞;或在培養管內加入二乙氨乙基葡聚糖,以增強衣原體吸附於易感細胞,提高分離培養陽性率。

3、類型根據抗原構造、包涵體性質和對磺胺敏感性,衣原體可分為沙眼衣原體、肺炎衣原體、鸚鵡熱衣原體三個種。沙眼衣原體有三個生物變種即沙眼生物變種、性病淋巴肉芽腫生物和鼠生物變種。其中沙眼生物變種有A、B、C、D、J、K、等血清型,性病淋巴肉芽腫生物變種有L1、L2、L3、L2a、四個血清。用單克隆抗體識別鸚鵡熱衣原抗原可分為4個血清型。肺炎衣原體只有1個血清型。

4、抵抗力衣原體耐冷不耐熱,56~60℃僅存活5~10min,在-70℃可保存數年。0.1%甲醛液、0.5%石炭酸30min可殺死。75%酒精0.5min可殺死。對四環素、紅霉素、螺旋黴素、強力黴素及利福平均很敏感。


致病性

1、致病機理衣原體能產生類似格蘭氏陰性菌內的內毒素,靜脈注射小白鼠,能迅速使動物死亡。體外試驗提示,衣原體表面脂多糖和蛋白促進其吸附雨易感細胞,促進易感細胞對衣原體的內吞作用,並能阻止吞噬體和溶酶體的融合,從而使衣原體在吞噬體內繁殖破壞細胞。受衣原體感染的細胞代謝被抑制,最終被破壞。

2、疾病舉例
(1)沙眼:由衣原體沙眼生物變種A、B、Ba、C血清型引起。主要經直接或間接接觸傳播,即眼-眼或眼-手-眼的途徑傳播。當沙眼衣原體感染眼結膜上皮細胞后,在其中增殖並在胞漿內形成散在型、帽型、桑椹型或填塞型包涵體。該病發病緩慢,早期出現眼瞼結膜急性或亞急性炎症,表現流淚、有粘液膿性分泌物、結膜充血等癥狀與體征。後期移行為慢性,出現結膜瘢痕、眼瞼內翻、倒睫、角膜血管翳引起的角膜損害,以致影響視力,最後導致失明。據統計沙眼居致盲病因的首位。1956年中國學者湯飛凡等人用雞胚卵黃囊接種法,在世界上首次成功地分離出沙眼衣原體,從而促進了有關原體的研究。

(2)包涵體包膜炎:由沙眼生物變種D~K血清型引起。包括嬰兒及成人兩種。前者系嬰兒經產道感染,引起急性化膿性結膜炎(包涵體膿漏眼),不侵犯角膜,能自愈。成人感染可因兩性接觸,經手至眼的的途徑或者來自污染的游泳池水,引起濾泡性結膜炎又稱游泳池結膜炎。病變類似沙眼,但不出現角膜血管翳,亦無結膜瘢痕形成,一般經數周或數月痊癒,無後遺症。

衣原體衣原體

(3)泌尿生殖道感染:經性接觸傳播,由沙眼生物變種D-K血清型引起。男性多表現為尿道炎,不經治療可緩解,但多數轉變成慢性,周期性加重,並可合併副睾炎、直腸炎等。女性能引起尿道炎、宮頸炎等,輸卵管炎是較嚴重併發症。該血清型有時也能引起沙眼衣原體性肺炎。

(4)性病淋巴肉芽腫:由沙眼衣原體LGV生物變種引起。LGV要通過兩性接觸傳播,是一種性病。男性侵犯腹股溝淋巴結,引起化膿性淋巴結炎和慢性淋巴肉芽腫。女性可侵犯會陰、肛門、直腸,出現會陰-肛門-直腸組織狹窄

(5)呼吸道感染:由肺炎衣原體及鸚鵡熱衣原體引起。肺炎衣原體引起急性呼吸道感染,以肺炎多見,也可致氣管炎、咽炎等。鸚鵡熱原為野生鳥類及家畜的自然感染,也可經呼吸道傳給人,發生呼吸道感染和肺炎。

(6)免疫性衣原體感染后能誘導產生型異性細胞和體液免疫。但保護性不強,為時短暫,因此衣原體的感染常表現為持續感染,反覆感染或隱形感染。有些衣原體抗原注入人皮后內可造成免疫病理損傷。

免疫性

衣原體感染后能誘導產生型異性細胞和體液免疫。但保護性不強,為時短暫,因此衣原體的感染常表現為持續感染,反覆感染或隱形感染。有些衣原體抗原注入人皮后內可造成免疫病理損傷。

5 衣原體 -衣原體感染的實驗室檢查

1、衣原體細胞培養:對沙眼衣原體敏感的細胞株為McCoy細胞、HeLa-229細胞和BHK細胞,最常用的是經放線菌酮處理的單層McCoy細胞,孵育后,用單克隆熒光抗體染色,可迅速診斷,但操作人員一定要熟練,需專業培養。培養法的敏感性為80%-90%,陽性即可確立診斷。

2、衣原體細胞學檢查法:在感染細胞內可有衣原體的包涵體存在。從感染部位採取細胞標本作塗片,姬姆薩染色包涵體是藍色或暗紫色,碘染色顯示褐色。但敏感性差(40%),目前已較少採用。近年來採用熒光素標記的抗衣原體單克隆抗體,來檢測細胞塗片中的衣原體,使用較為方便,目前主要用衣原體外膜蛋白(MOMP)的單克隆抗體的商品試劑(MicoTrak,Pathfinder,Monofluor)。結果判斷:要衣原體數>10個才能判為陽性。

6 衣原體 -標本採集

1、取材

衣原體感染可導致不育衣原體感染可導致不育
男性:用無菌棉拭子插入尿道約2cm處旋轉,靜止數秒鐘后取材。
女性:抹去宮頸口粘液,用無菌拭子插入宮頸管l-2cm旋轉取材。
尚可用尿道取材、潰瘍部位或腹股溝橫痃抽吸液。
2、標本處理
將拭子置於採集管內加入提取緩衝液於刻度,80℃水浴10分鐘,放置室溫冷卻至少5分鐘。
3、檢測
滴加5滴標本提取物於試驗板的檢測窗,靜置15分鐘,讀取結果。

7 衣原體 -分類

按第9版Bergey's細菌性分類手冊,衣原體在分類學上屬於衣原體目(Chlamydiales)、下有衣原體科(Chlamydiaceae)、衣原體屬(Chlamydia)。

現依據DNA的同源性和抗原構造將衣原體份為1屬4種。即衣原體屬(Chlamydiae)分為:沙眼衣原體(C. trachomatis)、肺炎衣原體(C. pneumoniae)、鸚鵡熱衣原體(C. psittaci)和獸類衣原體(C. pecorum)。

對人致病的主要是前三種衣原體,其中以沙眼衣原體最多見。

8 衣原體 -基因組特徵

衣原體基因組大小在1.04Mb~1.23Mb 之間。其中沙眼衣原體D血清型基因組1.04Mb, G+C佔41.3%,另有1個7493bp的質粒。整個基因組有894個編碼蛋白的基因,存在特彆強的DNA修復和重組系統,未發現前噬菌體基因。

9 衣原體 -抗原結構

形態結構 / 原核生物 / 衣原體形態結構 / 原核生物 / 衣原體

根據細胞壁的不同成分,可分為屬、種、型特異抗原。

1、屬特異抗原:是衣原體屬四種的共同抗原。位於胞壁,為脂多糖,類似革蘭陰性菌的脂蛋白-脂多糖複合物。用補體結合試驗檢測。

2、種特異抗原:大多數衣原體的種特異抗原位於主要外膜蛋白(major outer membrane protein, MOMP)上。用補體結合試驗和中和試驗檢測。

3、型特異抗原:為不同亞種的主要外膜蛋白抗原中的特異性成分。型特異性抗原差別的分子基礎是由氨基酸可變區的順序變化決定的。常用檢測的方法是單克隆抗體微量免疫熒光試驗(MIF)。

4、抗原變異:主要外膜蛋白抗原表位已發生變異,並易形成新的亞種。

10 衣原體 -沙眼衣原體快速檢測

沙眼衣原體快速檢測目前分定性和定量快速檢測。目前流行常用的為金標定性快速檢測(膠體金法)。其檢測原理為:用抗衣原體脂多糖單克隆抗體和羊抗鼠IgG多克隆抗體分別固定於固相硝酸纖維素膜,並和膠體金標記的另一抗衣原體脂多糖單克隆抗體及其他試劑和原料製成,應用膠體金免疫層析技術,採用雙抗體夾心的形式建立的衣原體檢測方法,用於女性宮頸和男性尿道中衣原體的檢測。從而達到檢測女性宮頸和男性尿道中衣原體的存在,臨床輔助診斷衣原體感染,試驗結果還需要臨床醫生結合患者癥狀、體征及其它檢查結果進一步確定的目的。

金標法定性沙眼衣原體快速檢測有著快速、方便、準確性高的優點。為臨床醫生的輔助診斷等節省了很多時間。為目前市面上沙眼衣原體快速檢測的主流。

11 衣原體 -治療

 衣原體對作用於細胞壁的藥物耐葯,如青霉素類、萬古黴素、桿菌肽,對於抑制膜蛋白和胞漿蛋白合成藥物敏感,如四環素、紅霉素等。 

  治療方案  

   首先四環素類,四環素500mg每日4次,連服7天,或用強力黴素100mg每日2次,連服7日。對四環素禁用或耐受性差的患者,可用含PHMB殺菌成分的嬌妍潔陰洗液,每日2次,連續7日。  

   另外近年來新開發的對各領域的感染症廣泛使用的新葯喹諾酮類,在治療衣原體方面臨床效果較好,其中常用的藥物有氧氟沙星(OFIX),環丙沙星(CPFX),洛美沙星,利福賓士療效果也較好。  

   治療中應注意的問題:  

 (1)四環素類藥物對妊娠婦女有致畸作用,故應禁用。  

 (2)從目前臨床觀察來看用喹諾酮類藥物比應用四環素類藥物為好,因為患者多數有淋球菌或其它合併感染。 

 (3)治療時間2-3周為宜。衣原體繁殖周期為48-72小時,寄生在細胞內,藥物滲入細胞內的濃度一般較低。所以治療時間需要長些。   

   (4)在男女感染后無癥狀或癥狀輕微者,可視為帶菌者,應接受正規治療。對患者的性伴要同時治療。  

 (5)聯合用藥:四環素類+嬌妍潔陰洗液+喹諾酮類

12 衣原體 -預防措施

新婚夫婦在準備懷孕前應該進行衣原體檢測,若存在衣原體感染,應於治癒后再懷孕;其次,妊娠早期檢測,若檢測為陽性,應及時治療,以免對胎兒構成損害。未孕婦女可服用美滿黴素、紅霉素等藥物,孕婦只限用紅霉素治療。紅霉素副作用小,衣原體是一種通過性接觸傳播的疾病,也存在間接性感染,因此,夫婦雙方重視性衛生,杜絕不潔性生活,對預防衣原體感染具有十分重要的意義。

13 衣原體 -導致不孕

衣原體陰道炎,該疾病在性傳播疾病中比較常見,主要的病原體是沙眼衣原體,根據相關數據說明患者一般感染后2-3周發病,嚴重侵犯男女的泌尿生殖器,特點是出現輕微的疼痛和滲液。
  當感染了這種類型的陰道炎后,炎症可通過子宮頸管上行至子宮內膜、卵巢、子宮附件、盆腔,甚至可波及肝臟。由於盆腔腹膜受累而引起盆腔腹膜炎,導致衣原體在腹水中增殖,從而發生一種被稱為柯蒂斯-菲茨-休綜合征的病變,從而出現卵巢周圍粘連、輸卵管通過障礙、阻寒,影響輸卵管傘撲獲卵細胞的陰道炎的癥狀,但是最嚴重的衣原體陰道炎的危害還要數輸卵管腔內炎症變化致內部狹窄,使卵細胞無法向子宮內移動,進而引起宮外孕這種比較危險的情況。有不孕不育醫院的臨床醫生說,如不及時治療,衣原體可侵入子宮和輸卵管,引起盆腔炎症,最後導致輸卵管疤痕性堵塞,進而造成婦女不孕症。

14 衣原體 -衣原體治療方法

一、Mp感染的臨床治療;Mp對青霉素類、頭孢類、氨基糖甙類不敏感。紅霉素、四環素高度敏感,能明顯減輕癥狀,縮短病程,減少併發症,療程為10~14d。Mp對紅霉素耐葯報道很少,但有耐受性差,對胃酸不穩定的缺點。四環素兒童不宜用。
二、Uu感染的臨床治療;臨床治療四環素類以米諾環素、多西環素為首選。米諾環素耐藥性最低;在精液中多西環素濃度為1μg/ml,在生殖道組織中為1。1與3。2μg/ml。多西環素0。1g,Bid,連服7d,Uu清除率為80%;Uu四環素耐葯株約6~10%。
三、Mh感染的臨床治療;臨床用藥四環素類多西環素為首選。即使Mh耐四環素株通常也對多西環素敏感。喹諾酮類首選SPLX、格帕沙星、OFLX、CPLX等。格帕沙星抗Mh活性(MIC0。015~0。05μg/ml)比OFLX強16倍。SPLX抗Mh活性比其它喹諾酮類強得多。林可黴素類克林黴素抗Mh作用更強,口服吸收好,毒性較小,故臨床常用。Mh對大環內酯類紅霉素天然抵抗,對阿奇黴素、羅紅霉素耐葯。

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