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間接血凝試驗

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1簡介

間接血凝試驗(IHA)是將抗原(或抗體)包被於紅細胞表面,成為致敏的載體,然後與相應的抗體(或抗原)結合,從而使紅細胞拉聚在一起,出現可見的凝集反應。

2操作過程

該技術在臨床檢驗中應用廣泛,以下簡述其操作過程。
致敏
致敏用的抗原或抗體要求純度高,並保持良好的免疫活性。用蛋白質致敏紅在低pH,低離子濃度下,用醛化紅細胞直接吸附即可。間接法則需用耦聯劑將蛋白質結合到紅細胞上。常用耦聯劑為雙耦氮聯苯胺(bis-diazotized benzidine,BDB)和氯化鉻。前者通過共價鍵,後者通過金屬陽離子靜電作用使蛋白質與紅細胞表面結合而達到致敏的目

血凝試驗

可在微量滴定板或試管中進行,將標本倍比稀釋,一般為1:64,同時設不含標本的稀釋液對照孔。在含稀釋標本1滴的板孔(或試管)中,加入0.5%致敏紅細胞懸液1滴,充分混勻,置室溫1~2h,即可觀察結果。凡紅細胞沉積於孔底,集中呈1圓點的為不凝集(一)。如紅細胞凝集,則分佈於孔底周圍。根據紅細胞凝集的程度判斷陽性反應的強弱,以抖凝集的孔為滴度終點。
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