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1簡介

雙縮脲反應產物

  雙縮脲反應產物

雙縮脲結構

  雙縮脲結構

雙縮脲試劑(biuret reagent)是由雙縮脲試劑A(NaOH)和雙縮脲試劑B(CuSO4)兩種試劑組成.

2成份

雙縮脲試劑A的成分是氫氧化鈉的質量分數為0.1 g/mL的水溶液;
雙縮脲試劑B的成分是硫酸銅的質量分數為0.01 g/mL的水溶液。

3製備

0.1 g/mL的氫氧化鈉水溶液和0.01 g/mL的硫酸銅水溶液,現配現用。

4應用

雙縮脲(NH3CONHCONH3)是兩 個分子脲經180℃左右加熱,放出一個分子氨后得到的產物。在強鹼性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡合物,稱為雙縮脲反應。凡具有兩個醯胺基或兩個直接連接的肽鍵,或能過一個中間碳原子相連的肽鍵,這類化合物都有雙縮脲反應。
H2O
O=C C=O
HN NH
R-CH CH-R
O=C Cu C=O
HN NH
R-CH CH-R
H2O
試劑作用
雙縮脲試劑可以驗證蛋白質的存在。
具體方法是:
先將雙縮脲試劑A加入組織樣液,振蕩均勻(必須營造鹼性環境),再加入雙縮脲試劑B,振蕩均勻。如果組織里含有蛋白質,那麼會看到溶液變成紫色。具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應。蛋白質的肽鍵在鹼性溶液中能與Cu2+絡合成紫紅色的絡合物。顏色深淺與蛋白質濃度成正比。
雙縮脲(NH2CONHCONH2)是兩個分子脲經180℃左右加熱,放出一個分子氨后得到的產物。
雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲,因蛋白質中也有-CONH-基也可用於檢驗蛋白質,與蛋白質接觸后的顏色呈紫色。

5注意事項

在使用雙縮脲試劑時候,必須注意,必須是先加0.1 g/mL氫氧化鈉溶液,再加0.01 g/mL硫酸銅的水溶液。(若先加入硫酸銅[CuSO4]溶液,再加入氫氧化鈉[NaOH]溶液,則無法充分製造鹼性環境,此時CuSO4會與NaOH發生複分解反應,生成藍色氫氧化銅[Cu(OH)2]沉澱,導致現象不清,無法較好地達到實驗目的.)
必須即配即用,以免生成氫氧化銅沉澱。
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