標籤: 暫無標籤

1簡介

DNA雙螺旋結構模型,不僅與其生物功能有密切關係,還能解釋DNA的重要特性棗變性與復性,這對於深入了解DNA分子結構與功能的關係又有重要意義。

2DNA變性

(DNAdenatur)
DNA變性是指核酸雙螺旋鹼基對的氫鍵斷裂,雙鏈變成單鏈,從而使核酸的天然構象和性質發生改變。變性時維持雙螺旋穩定性的氫鍵斷裂,鹼基間的堆積力遭到破壞,但不涉及到其一級結構的改變。凡能破壞雙螺旋穩定性的因素,如加熱、極端的pH、有機試劑甲醇、乙醇、尿素及甲醯胺等,均可引起核酸分子變性。
變性DNA常發生一些理化及生物學性質的改變: 1)溶液粘度降低。DNA雙螺旋是緊密的剛性結構,變性後代之以柔軟而鬆散的無規則單股線性結構,DNA粘度因此而明顯下降。? 2)溶液旋光性發生改變。變性后整個DNA分子的對稱性及分子局部的構性改變,使DNA溶液的旋光性發生變化。    3)增色效應(hyperchromic effect)。指變性后DNA溶液的紫外吸收作用增強的效應。DNA分子中鹼基間電子的相互作用使DNA分子具有吸收260nm波長紫外光的特性。在DNA雙螺旋結構中鹼基藏入內側,變性時DNA雙螺旋解開,於是鹼基外露,鹼基中電子的相互作用更有利於紫外吸收,故而產生增色效應。

3融解溫度

(Tm,melting temperature)
對雙鏈DNA進行加熱變性,當溫度升高到一定高度時,DNA溶液在260nm處的吸光度突然明顯上升至最高值,隨後即使溫度繼續升高,吸光度也不再明顯變化。若以溫度對DNA溶液的紫外吸光率作圖,得到的典型DNA變性曲線呈S型(如下圖)。可見DNA變性是在一個很窄的溫度範圍內發生的。通常將核酸加熱變性過程中,紫外光吸收值達到最大值的50%時的溫度稱為核酸的解鏈溫度,由於這一現象和結晶的融解相類似,又稱融解溫度(Tm,melting temperature)。在Tm時,核酸分子內50%的雙螺旋結構被破壞。特定核酸分子的Tm值與其G+C所佔總鹼基數的百分比成正相關,兩者的關係可表示為:? Tm=69.3+0.41*(G+C)%?一定條件下(相對較短的核酸分子),Tm值大小還與核酸分子的長度有關,核酸分子越長,Tm值越大;另外,溶液的離子強度較低時,Tm值較低,融點範圍也較寬,反之亦然,因此DNA製劑不應保存在離子強度過低的溶液中。
上一篇[商事賬簿]    下一篇 [豆油]

相關評論

同義詞:暫無同義詞